fa جداسازی و کشت جزایر لانگرهانس موش صحرایی و ارزیابی میزان حیات آنها عمومى General پژوهشي Research <span style="font-family: tahoma,arial,helvetica,sans-serif"><b>مقدمه: </b>مطالعات متعددی جهت بررسی پیوند پانکراس به عنوان روشی نسبتاً قطعی در درمان دیابت نوع1 انجام می‌شوند .از آنجاکه میزان حیات جزایر برای پروگنوز پیوند مهم می‌باشد، در مطالعه حاضر مراحل لازم برای تهیه جزایر سلولی جهت پیوند در رت، انجام شده است. هدف از انجام این مطالعه ارزیابی میزان حیات مجموعه جزایر بدست آمده در روزهای مختلف و در نهایت پیشنهاد زمان مناسب جهت پیوند می‌باشد.<br><b>روش‌ها:</b>پانکراس رت جدا شده، بعد از<br>Chopping، توسط کلاژنازV برای مدت20 دقیقه در دمای C 37 C37ْ هضم شده و 3 بار سانتریفوژ شد.<br>سپس جزایر زیر میکروسکوپ جدا شده و در محیط کشت RPMI1640 در دمای Cْ37 ، برای 6 روز انکوبه شدند. هر Well حاوی 45-35 جزیره بود. میزان حیات جزایر پانکراس با ارزیابی میزان رنگ پذیری آنها با Acridine Orange / Propiodine Iodide و بررسی زیر میکروسکوپ فلورسنت تعیین گردید که در ساعت‌های 0 ، 24 ، 48 و روزهای 3 و 5 و 6 انجام پذیرفت.<br><b>یافته‌ها:</b> میزان حیات پس از انکوباسیون به تدریج افزایش می‌یابد تا به حداکثر میزان خود در روز دوم می‌رسد. پس از آن میزان حیات سلول‌ها هستیم سیر نزولی را طی می‌کند به‌طوری که در روزهای 5 و 6 به شدت کاهش یافته و به حدود صفر می‌رسد.<br><b>نتیجه‌گیری:</b> وضعیت حیاتی سلول های جزیره ای پانکراس پس از جداسازی و تخلیص بدنبال کشت در محیط مناسب بهبود می یابند، به‌طوری که این سلول‌ها بهترین آمادگی جهت پیوند را پس از 48 ساعت انکوباسیون بعد از جداسازی از محیط بدن دارند.<br></span><p></p> <b>Background:</b> Many researches have been conducted on islet cells' transplantation for a definitive treatment of diabetes mellitus type1. As the viability of the islets is the most important factor in predicting the transplantation prognosis, we have designed a study to isolate rat's islets. The aim of the study was to assess the viability of the islets at different stages and suggest the best transplantation time.<b> <br>Methods:</b> Pancreatic islets were isolated from male rats (250-300gr) by standard surgical procurement followed by intraductal HBSS distension, chopping and digestion with collagenase (type V). After being centrifuged for 3 times, the islets were then hand-picked and incubated in 37oC with RPMI 1640 media for 6 days. Each well contained 35-45 islets. Viability of islets was assessed by 2 independent investigators, giving score 0-2 to the color of islets under florescent microscope after Propidium iodide/Acridine orange staining at 6 times: just after the incubation, 24h, 48h, 3rd day, 5th and 6th day. <br><b>Results:</b> The viability of the islet cells was gradually increased after the incubation as we had the most viability rate after the second day, while it decreased after this period and reached the least rate on the 5th and 6th day.<b> <br>Conclusion:</b> The islets' viability increased following the cell culture after the isolation procedure, as they have the best condition for transplantation after 48 hours. As the islets’ viability is the most critical point in transplantation, further studies evaluating the effects of different interventions on viability is needed. دیابت ، جزایر لانگرهانس کشت داده شده ، میزان حیات Diabètes mellitus, Isolated islets, Viability 27 36 http://ijdld.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-334&slc_lang=fa&sid=1 Bagher Larijani باقر لاریجانی No Seyed Sajad Mohseni Salehi سید سجاد محسنی صالحی Yes Shirin Irani شیرین ایرانی No Marjan Akbari Kamrani مرجان اکبری کامرانی No Nasim Sheykh Bahaei نسیم شیخ بهایی No Ahmad Sajadi احمد سجادی No Seyed Naser Ostad سید ناصر استاد No