fa مطالعه تغییرات بیان ژن لپتین در موش های صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین عمومى General پژوهشي Research <p align="right" dir="rtl"><font face="tahoma,arial,helvetica,sans-serif">لپتین، یک هورمون پپتیدی است که محصول ژن ob می باشد. نقش این هورمون لیپواستاتیک، کنترل و تنظیم وزن بدن از طریق کاهش اشتها یا افزایش صرف انرژی در انسان و جوندگان است. در این مطالعه تغییرات بیان ژن لپتین در بافت‌های مختلف موش‌های صحرایی دیابتی القاء شده توسط استرپتوزوتوسین بررسی شدند.<br><b>روش‌ها:</b> تعداد 40 موش صحرایی نر از نژاد اسپراگ دالی انتخاب شدند. 20 رت پس از تزریق داخل صفاقی mg/kg 60 استرپتوزوتوسین دیابتی شدند. میزان قند خون به روش آنزیمی گلوکز اکسیداز، لپتین به روش ایمنواسی و انسولین به روش الیزا اندازه گیری شدند. بعد از یک هفته، از هر دو گروه بافت چربی اپیدیدیم، کبد و طحال برداشت گردید. برای بررسی تغییرات بیان ژن لپتین، RNA بافتی استخراج گردیده و cDNA لپتین با تکنیک RT-PCR بعنوان ژن مورد مطالعه به همراه cDNA بتا اکتین، به عنوان کنترل داخلی بدست آمد و متعاقباً PCR انجام گردید. محصول عمل RT-PCR بر روی ژل آگارز 2 درصد الکترفورز گردید.<br><b>یافته‏ ها: </b>میانگین غلظت سرمی لپتین در قبل از ایجاد دیابت 45/0 ±23/5 نانوگرم در میلی لیتر محاسبه شد. این مقدار پس از دیابتی کردن رت‌ها با استرپتوزوتوسین به مقدار 25/0 ± 79/0 نانوگرم در میلی لیتر رسید که این کاهش کاملاً معنی‌دار بود (05/0P<). بین میانگین غلظت لپتین با انسولین در رت‌های دیابتی، همبستگی مستقیم و معنی داری مشاهده شد (05/0, P<37/0 r=). در صورتی که این همبستگی در قبل از تیمار با استرپتوزوتوسین معکوس و معنی دار بود (05/0P<، 28/0- r=). مطالعه بیان ژن لپتین با روش RT-PCR در بافت‌های چربی اپیدیدیم، کبد و طحال، نشان داد که شدت باند لپتین با وزن ملکولی bp 453 در رت های دیابتی نسبت به رت‌های سالم کاهش یافته بود. ولی شدت باند بتا اکتین به عنوان کنترل داخلی با وزن ملکولی bp403 در هر دو گروه ثابت باقی مانده بود. بعلاوه کاهش بیان ژن لپتین در بافت چربی اپیدیدیم نسبت به دو بافت کبد و طحال کاملاً چشمگیر بود. <br><b>نتیجه‏ گیری:</b> از این یافته می توان استنباط کرد که بیان ژن لپتین تحت کنترل سازوکار است که می تواند وابسته به انسولین باشد و شاید با تعدیل تنظیم بیان ژن لپتین در بیماران دیابتی بتوان از آن در موارد کاربردی بالینی استفاده کرد.</font></p> <b>Background: </b>Leptin, a peptide hormone, is the product of "ob" Gene. Leptin regulate body weight and composition through reducing appetite and energy expenditure in rodents and humans. The aim of this study was to evaluate differences in expression of Leptin Gene in different tissues of streptozotocin induced diabetic rats. <br><b>Methods:</b> 40 Sprague Dawely rat were selected. Intra peritoneal injection was carried out in 20 rats and another 20 rats were used as control. After injection of 60mg/kg Streptozotocin, animals were transformed into diabetic. Glucose was measured by glucose oxidase method. Leptin and insulin were measure by commercially available immunoassay kits. After one week treatment, different tissues including adipose tissues, Spleen, epidydimis, and Liver of both control and experimental animals were dissected. For investigation of any changes of the Leptin gene expression in different tissues, RNA was extracted using Trizo1 method. By using RT-PCR technique, Leptin cDNA and β-actin cDNA as internal control were constructed and PCR was carried out. The RT-PCR products were detected on 2% agarose gel using electrophoresis. <br><b>Results:</b> Mean serum levels of Leptin was 5.23± 0.45 ng/ml before injection of streptozotocin and markedly decreased in STZ induced diabetic rats to 0.79±0.25 ng/ml. This decrease was statistically significant P<0.05). There was a direct and significant correlation between leptin and insulin in streptozotocin-induced diabetic rats (r=0.37, P<0.05 ) while, this was reverse in control rats ( r= -0.28, P<0.05). Using RT-PCR method, Leptin gene expression in different tissues including fat epidydimis, liver, and spleen showed that the intensity of leptin band with 452 bp was decreased in diabetic rats in comparison to normal rats. Actin Gene expression was identified in PCR products having 403 bp and the intensity was constant in both groups. The reduction rates of "ob" mRNA in fat epidydimis tissue in STZ diabetic rats was remarkable in comparison to Spleen and Liver. <br><b>Conclusion: </b> It is speculated that Leptin gene could be under regulation of insulin dependent mechanism in diabetic rats and by modulating Leptin gene expression in diabetic patients, it may be useful in clinical practices. بیان ژن لپتین، دیابت نوع یک، استرپتوزوتوسین Leptin Gene expression, Streptozotocin, Type 1 Diabetes 127 133 http://ijdld.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-372&slc_lang=fa&sid=1 Nosratollah Zarghami نصرت اله ضرغامی Yes Behrang Alani بهرنگ علنی No Habib Onsori حبیب عنصری No Akram Tamizi اکرم تمیزی No Mehran Mesgari مهران مسگری No