fa سطح سیتوکراتین 18، فعالیت آنزیم پاراکسوناز و پروفایل لیپیدی در بیماران کبد چرب غیرالکلی در ایران تخصصي Special پژوهشي Research <p dir="rtl"></p> <p dir="rtl"><a name="_Toc409330645"></a><a name="_Toc409330531">مقدمه</a><span face="">: بیماری کبد چرب غیرالکلی(</span><span dir="ltr"><span face="">NAFLD</span></span>) به‌عنوان یک بیماری رو به افزایش در بزرگسالان و کودکان در جهان مطرح است. چاقی، مقاومت به انسولین و هیپرتری‌گلیسیریدمی نقش اصلی در همه‌گیری این بیماری ایفا می‌کنند. <span dir="ltr"><span face="">NAFLD</span></span> در افرادی‌که الکل مصرف نمی‌کنند می‌تواند به‌صورت استئاتوز ساده شروع شده تا استئاتوهپاتیت، فیبروز و سیروز پیشرفت نماید. سیتوکراتین 18 (<span dir="ltr">CK</span><span dir="ltr">-18</span>) اصلی‌ترین رشته پروتیئنی متوسط در کبد است. در آسیب سلول‌های کبدی و مرگ سلولی در طی آپوپتوز، رشته‌های <span dir="ltr"><span face="">CK-18</span></span> در اثر تاثیر کاسپاز‌ها در جریان خون آزاد می‌شود. یکی از این روش‌های غیرتهاجمی تشخیص، بیومارکرهای جدیدی هستند که از بین آن‌ها <span dir="ltr"><span face="">CK18</span></span> اخیراً به‌عنوان یک مارکر آپوپتوزی و بسیار امیدوارکننده مطرح است. نشان داده ‌شده در مبتلایان به <span dir="ltr"><span face="">NAFLD</span></span>، افزایش استرس اکسیداتیو ممکن است به استئاتوهپاتیت غیرالکلی (<span dir="ltr"><span face="">NASH</span></span>) منجر شود. فعالیت آنزیم پاراکسوناز (<span dir="ltr"><span face="">(PON1</span></span> می‌تواند برای بررسی پراکسیداسیون لیپیدی و پیگیری بیماران مبتلا به <span dir="ltr"><span face="">NAFLD</span></span> در نظر گرفته شود.</p> <p dir="rtl"><span face="">هدف پژوهش حاضر، بررسی سطح </span><span dir="ltr">CK</span><span dir="ltr">-18</span> به‌عنوان یک مارکر آپوپتوز سلول‌های کبدی و آنزیم پاراکسوناز به‌عنوان یک مارکر پراکسیداسیون لیپیدی بوده است.</p> <p><strong>&shy;</strong><strong> </strong>این یک مطالعه شاهدار تصادفی است که سطح <span dir="ltr">CK</span><span dir="ltr">-18</span>، آنزیم پاراکسوناز و پروفایل لیپیدی در 51 بیمار مبتلا به <span dir="ltr">NAFLD</span> بررسی شده با سونوگرافی، در مقابل 30 فرد سالم اندازه‌گیری شده است. قطعه <span dir="ltr">M30</span> با روش الایزا ساندویچ برای تعیین سطوح در گردش اشکال مختلف از <span dir="ltr">CK-18</span> و به‌عنوان بیومارکر جایگزین مرگ سلول پیشنهادشده است. آنتی‌بادی جهت تشخیص <span dir="ltr">M30</span>، یک اپی‌توپ جدید در موقعیت 387-396 از <span dir="ltr">CK18</span>، به‌اصطلاح <span dir="ltr">CK18-Asp396</span> را شناسایی می‌کند که تنها پس از برش پروتئین توسط کاسپاز آشکار می‌شود و به‌عنوان یک نشانگر انتخابی آپوپتوز فرض شده است. فعالیت <span dir="ltr">PON1</span> با استفاده از یک سوبسترای سنتتیک مورد سنجش قرار گرفت. از سوبسترای پاراکسون (دی اتیل پارا نیترو فنیل فسفات)، برای تعیین فعالیت <span dir="ltr">PON1</span> نسبت به پاراکسون در طول موج 412 و دمای 37 درجه استفاده شد.<strong>‌</strong>: این بررسی نشان می‌دهد سطح سیتوکراتین 18 (005/0=<span dir="ltr">p</span>)، آنزیم پاراکسوناز (03/0=<span dir="ltr">p</span>)، تری‌گلیسیرید (04/0=<span dir="ltr">p</span>) و لیپوپروتیئن با چگالی پایین (04/0=<span dir="ltr">P</span>) در بیماران کبد چرب غیرالکلی در مقایسه با افراد سالم افزایش داشته است، همچنین بین <span dir="ltr">CK</span><span dir="ltr">-18</span> و پاراکسوناز با مراحل اولیه بیماری کبد چرب همبستگی وجود دارد.: این مطالعه نشان می‌دهد که اندازه‌گیری سطح سیتوکراتین18 می‌تواند در پیش‌بینی بیماران کبد چرب غیرالکلی مفید باشد و فعالیت آنزیم پاراکسوناز (<span dir="ltr">(PON1</span> می‌تواند برای بررسی پراکسیداسیون لیپیدی و پیگیری بیماران مبتلا به <span dir="ltr">NAFLD</span> در نظر گرفته شود<span dir="ltr">.</span></p> <p><strong>Background: </strong>Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a chronic liver disease is increasing in adults and children worldwide. Obesity, insulin resistance or diabetes type II, hyperlipidemia and hypertriglyceridemia plays a major role in the epidemiology of this disease. Cytokeratin 18 (CK-18) the major intermediate filament protein in the liver is a marker of increased hepatocyte apoptosis. The aim of this study was to determinate CK-18 level as a marker of hepatocyte apoptosis and paraoxonase as a biochemical marker for lipid peroxidation.</p> <pre> <strong>Methods:</strong> This case&ndash;control study was done on 51 subjects with confirmed NAFLD by ultrasound and 30 healthy individuals. CK-18 is proposed as a biomarker alternative cell death. The serum was used for measurement of the apoptosis-associated neo-epitope in the C-terminal domain of CK-18 by the M30-Apoptosense ELISA kit. The M30 detection antibody recognizes a neo-epitope mapped to positions 387 to 396 of CK18, so called CK18-Asp396 that is only revealed after caspase cleavage of the protein and is postulated as a selective biomarker of apoptosis. Serum PON1 activity was assayed using a synthetic substrate. Paraoxon substrate (diethyl-p nitrophenylphosphate), was deliberated using the increase of absorbance at 412 nm at 37 ◦C. </pre> <h1><span face="">Results: There were significant differences regarding serum cytokeratin 18 (p=0.005), paraoxonase activity (p=0.03), triglycerides (p=0.04) and low-density lipoprotein (p=0.04) between NAFLD and healthy subjects. Between CK-18 and paraoxonase with the early stages of fatty liver disease are associated</span>.</h1> <h1><span face="">Conclusion: This study suggests that serum levels of cytokeratin 18 can be useful in predicting non-alcoholic fatty liver disease. Paraoxonase activity (PON1) should be considered a biochemical marker of lipid peroxidation and the need for follow-up in patients with NAFLD</span></h1> <p></p> <p><strong>Keywords:</strong> Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), non-alcoholic steatohepatitis (NASH), Cytokeratin 18 (CK-18), Paraoxonases</p> کبد چرب غیرالکلی (NAFLD), استئاتوهپاتیت غیرالکلی (NASH), سیتوکراتین 18 (CK-18), پاراکسوناز Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), non-alcoholic steatohepatitis (NASH), Cytokeratin 18 (CK-18), Paraoxonases 183 191 http://ijdld.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-374-1&slc_lang=fa&sid=1 Nahid Teimouri ناهید تیموری No Department of Biochemistry, Falavarjan Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran گروه بیوشیمی، واحد فلاورجان Hashem Nayeri هاشم نیری nahidteimouri1400@gmail.com Yes Department of Biochemistry, Falavarjan Branch, Islamic Azad University, Isfahan, Iran گروه بیوشیمی، واحد فلاورجان